無菌室又叫接種室,是進行系統(tǒng)接種、細菌純化等無菌操作的實驗室。無菌室滅菌的目的是保證檢驗結(jié)果的準確性和可靠性。通常有三種滅菌方法,臭氧滅菌,紫外線照射和化學熏蒸。
1臭氧殺菌。
臭氧是一種強氧化劑,殺菌過程是一種氧化反應。采用臭氧殺菌,殺菌徹底,無殘留,可殺死細菌和孢子、病毒、真菌、霉菌,并破壞肉毒毒素。臭氧是一種氣體,可以迅速擴散到整個殺菌空間,殺菌無死角。臭氧消毒空氣必須在密閉無人的空間內(nèi)進行。消毒后30分鐘后允許進入。因為臭氧比空氣密度大,所以臭氧發(fā)生器需要安裝在無菌室的頂部。無菌室內(nèi)滅菌時間為30分鐘,要求空間內(nèi)臭氧濃度不低于20mg/m3。
2紫外線照射。
紫外線滅菌是一種物理滅菌方法,是利用適當波長的紫外線破壞微生物細胞內(nèi)的DNA或RNA結(jié)構(gòu),導致生長細胞死亡,從而達到殺菌的效果,這也是微生物檢驗無菌室中很常見的一種殺菌方法。紫外線殺菌方法簡單、使用方便、經(jīng)濟,可殺滅多種微生物,包括細菌、病毒、真菌、立克次體和支原體。但紫外線只能殺死直接暴露的微生物,對于死角或無法暴露的物體無效。
3化學熏蒸。
化學熏蒸是一種非常傳統(tǒng)的空間殺菌方法,其目的是用揮發(fā)性化學物質(zhì)的蒸汽殺滅空間微生物,常用的有甲醛、戊二醛、過氧化氫、過氧乙酸等。
以常用的甲醛熏蒸為例。甲醛熏蒸,又稱甲醛高錳酸鉀熏蒸,是在高錳酸鉀溶液中加入40%的甲醛溶液。兩者反應釋放大量熱量,使甲醛蒸發(fā)到空間中,從而使無菌室消毒。
甲醛熏蒸的殺菌效果比較理想的,對霉菌等難以清除的污染細菌也有很好的殺菌效果。很多制藥企業(yè)中經(jīng)常使用。如果一些生產(chǎn)區(qū)域長期受到霉菌污染,則會考慮甲醛熏蒸。
由于甲醛是一種高度致癌的化學物質(zhì),對人體的危害很大,在使用過程中要特別注意,殘留量要嚴格控制。每次熏蒸后至少要通風24小時。
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